一、試劑間化學(xué)污染的來源
全自動生化分析儀發(fā)展迅速，具有多項目、多樣本的處理能力，檢測速度不斷的提高，但由于共用吸樣針、試劑針、攪拌棒以及比色杯，當(dāng)生化儀長期使用致其清洗能力下降、比色杯老化后引起吸附力增加、生化儀內(nèi)污垢的積聚、測試順序安排不當(dāng)，且常規(guī)清洗不能有效消除交叉污染時，就會增加試劑間化學(xué)污染的可能性，引起測定結(jié)果不準(zhǔn)確。
１.試劑針污染：目前大多數(shù)全自動生化分析儀采用雙試劑檢測樣本，，試劑Ｒ１、Ｒ２的吸取與吐出，一般分別只配有一套試劑針。當(dāng)試劑針在清洗不*，或黏附力增加時，殘留試劑可能會對下一相臨檢測結(jié)果造成影響。
２.攪拌棒污染：在試劑與樣本混合后，往往需要攪拌棒加以混勻，而攪拌綁若清洗不*，或黏附力增加時，殘留試劑可能會對下一相臨檢測結(jié)果造成影響。
３.比色杯污染：生化分析儀的比色杯一般是循環(huán)使用的，每個比色杯檢測完畢后，進(jìn)行清洗，然后繼續(xù)下一個檢測項目的檢測。當(dāng)某個比色杯清洗不*時，吸附在比色杯上的上一個項目的殘留試劑，可能會對在這個比色杯中進(jìn)行的下一個項目的檢測結(jié)果造成影響。
以上３種可能的污染，以比色杯污染最為嚴(yán)重，因此比色杯最難以清洗干凈，且在實際工作中難以判斷該比色杯上一測試的項目；試劑針吸量較大，亦難以清洗干凈。
二、試劑間化學(xué)污染的類型
試劑間化學(xué)污染的原因很多，常見的類型主要有以下幾種：
１.試劑成分的直接污染：上一測定試劑中含有下一測定所需要測定的物質(zhì)，直接干擾下一檢測的測定結(jié)果。如：AMY試劑中含有較高濃度的Ca2+ ；ALP（IFCC法）、CK（NAC法）、CK-MB（NAC法）、CO2（PEPC法）、AMY（EPS法）、TG等試劑中含有Mg2+；GLU（氧化酶法）、TP、ACP試劑中含有較高濃度的K+；ChE、CHOL、GLU（GOD法）、UA（尿酸酶法）、LDH（IFCC法）、HBDH（DGKC法）等試劑中含有磷酸緩沖液；CHOL、TG、HDL-C試劑中含有膽酸鈉；AST（IFCC法）、ALT（IFCC法）、試劑中含喲高活性LDH；以上試劑的交叉污染就會分別對Ca2+、Mg2+、K+（紫外酶法）、P、TBA、LDH的測定結(jié)果造成干擾。
２.試劑成分參與反映：上一個試劑中含有的某種試劑成分與下一反應(yīng)所要測定的底物有作用，因而干擾下一反應(yīng)的測定結(jié)果。如：（1）鎂測定試劑的絡(luò)合劑亦能與鐵結(jié)合，影響鐵有鐵絡(luò)合劑的結(jié)合；（2）直接膽/紅素（重氮法）試劑含EDTA，鎂試劑中含有EGTA，均能與Ca結(jié)合，從而Ca的測定；（3）以甘油作為酶保護劑的試劑，回對TG的測定帶來干擾；（4）鈣（MTB法）試劑對鉀有負(fù)干擾；（5）CHOL試劑中含有膽/固醇酯酶，可水解膽/固醇酯形成游離膽固/醇，而引起對游離膽/固醇測定的干擾。
３.反應(yīng)進(jìn)程相同：上一試劑所引導(dǎo)的反應(yīng)對下一個項目的反應(yīng)進(jìn)程帶來間接的干擾，下一項目所測定的是前后兩個項目反應(yīng)的綜合作用結(jié)果。如：（1）當(dāng)上一個反應(yīng)產(chǎn)物為H2O2時則對以Trinders反應(yīng)產(chǎn)生顏色的測定結(jié)果引起干擾。如UA對CHOL結(jié)果的影響；CHOL對CREA（酶法）測定結(jié)果的影響；GLU（氧化酶法）對CREA測定結(jié)果的影響。（2）CK（NAC法）、CK-MB（NAC法）試劑中含GLU成分，其分析方法的原理中GLU的已糖激酶（HK）反應(yīng)過程，因此可能對GLU的測定帶來干擾。
４.影響反映條件：影響下一項目的反應(yīng)條件如pH等，從而改變反應(yīng)速率。如：（1）直接膽紅/素（釩酸鹽氧化法）試劑中含有表面活性劑的酒石酸鹽緩沖液會影響ALT活性，對測定結(jié)果有負(fù)干擾。（2）CREA（苦味/酸速率法）反應(yīng)條件為堿性，果糖胺（動力學(xué)法）反應(yīng)條件為酸性，受到污染后反應(yīng)速率會減慢。（3）CREA（酶法）史試劑中含有抗壞血酸氧化酶，影響了氧化還原反應(yīng)的進(jìn)程，回對 TBA（酶循環(huán)法）測定結(jié)果有影響。
三、試劑間化學(xué)污染的判別
由于試劑中化學(xué)成分非常復(fù)雜，各種穩(wěn)定劑、反應(yīng)物質(zhì)、緩沖體系共存，且各品種、各廠商的試劑內(nèi)含物均不同，因此時機間的化學(xué)污染往往較難判別。日常工作中往往是儀器評估沒問題，而用戶使用時存有污染；質(zhì)控品和Westgard法則不起作用，質(zhì)控往往在控；污染具有偶然性，并不是每次都出現(xiàn)。這就導(dǎo)致了判別此類污染的困難性。
當(dāng)按照日常的分析順序出現(xiàn)異常結(jié)果時，將出現(xiàn)異常結(jié)果的分析項目及其前一個項目單獨復(fù)檢又恢復(fù)正常，多是由于發(fā)生試劑間交叉污染所致。但由于試劑成分的復(fù)雜多樣性，儀器狀況的*性，可能發(fā)生的試劑間交叉污染的情況不盡相同。各個公司所提供的產(chǎn)品說明書長不能夠全面的反映試劑組成的情況，因此需要通過試驗才能發(fā)現(xiàn)試劑交叉污染可能帶來的干擾。一般可以用以下試驗來加以判別：
１.將某一試劑作為樣本進(jìn)行全套項目測定，觀察各項生化結(jié)果的情況，進(jìn)而確定發(fā)生試劑交叉污染時造成直接干擾的項目。
２.一份樣本分成兩份，一份加生理鹽水或其他適當(dāng)?shù)南♂屢?，另一份加等量的某試劑，同時測定，觀察結(jié)果的變化，進(jìn)而確定發(fā)生試劑交叉污染時造成直接干擾的項目。
３.試劑交叉污染試驗方法：（1）交叉污染初試：假設(shè)有3個項目 A，B，C，以一混合血清作為標(biāo)本，按以下順序測試：A，A，A，A，A，B，A，C，A，B，B，B，B，B，C，B，C，C，C，C，C。得到的結(jié)果分別為：A1，A2，A3，A4，A5，BA-B，AB-A，CA-C，AC-A，B1，B2，B3，B4，B5，CB-C，BC-B，C1，C2，C3，C4，C5（AB-A：表示B項目對A項目污染時A項目的測定值，其余表示類同）。以A2-A5、B2-B5、C2-C5的4次測定平均值分別作為A、B、C項目無污染時的測定值。若（AB-A/A×100%）<95%或>105%則強烈支持B試劑對A有交叉污染。(2)疑似污染確認(rèn)：若上述初試驗結(jié)果B對A有污染，則可進(jìn)行以下試驗進(jìn)行確認(rèn)，測定順序為：B,A,A,A,結(jié)果為：B，A1，A2，A3。若（A1/A3×100%）<95%或>105%，則強烈支持B對A有交叉污染。A1→A3的結(jié)果可觀察受B污染的程度是否逐漸減輕。
四、消除試劑間化學(xué)污染的方法
１.要求檢驗人員對儀器工作流程、試劑組成、測定原理要了如指掌，對試劑交叉污染的各種可能性加以考慮，合理設(shè)計程序。更換試劑時應(yīng)仔細(xì)研究說明書，發(fā)現(xiàn)和避免可能存在的試劑交叉污染。
２.當(dāng)發(fā)現(xiàn)有交叉污染時，應(yīng)對儀器進(jìn)行保養(yǎng)，如更換比色杯、管道，用無水乙醇擦洗試劑針和攪拌棒，檢查清洗裝置及效果等。
３.合理安排檢測項目的順序，在有交叉污染的檢測項目中間插入一個或兩個非污染項目。最*的做法則是將被干擾項目置于干擾項目之前，以消除干擾發(fā)生的可能。由于各個感廠商試劑盒原理不同，內(nèi)含成分不同，故無固定的測定順序格式，需要自己摸索。一般檢測順序有以下原則：（1）不受上一試劑的干擾；（2）不影響下一試劑測定；（3）不影響測試速度；（4）充分運用剩余試劑位開展新項目；（5）利用好儀器的功能。
４.當(dāng)合理設(shè)置測試順序無法消除交叉污染時，可使用生化儀的試劑針、比色杯清晰程序，對試劑針、比色杯進(jìn)行2次或多次清洗。用堿性清洗掖及酸性清洗掖沖洗試劑針可以有效地避免攜帶污染。
５.選用具有抗交叉污染的試劑盒：如在游離膽固/醇試劑中添加膽/固醇酯酶抑制劑，以減少膽固/醇酯酶水解膽/固醇酯而引起對游離膽固/醇測定的污染。
實際工作中，用全自動生化分析儀進(jìn)行連續(xù)的多個項目的測定，每個反應(yīng)的詳細(xì)過程難以探知，特別是比色杯的交叉污染無明顯的特征，因此應(yīng)理論分析結(jié)合實際應(yīng)用摸索出一套符合本單位的方法
