隨著疫情的常態(tài)化，大家越來越熟悉新/冠核酸檢測。新/冠核酸快速檢測是新/冠病毒檢測“金標準"，可是對于檢驗人來說，這個金標準可不簡單，眾所/周知PCR檢測技術本來就屬于高技術檢測。再加上新/冠核酸檢測的特殊性，對標本的檢測帶來巨大困難，隨之而來的就是各種假陽性、假陰性的結果。那么如何解決這些問題就成為檢驗人的一個難題。其實如果我們對PCR檢測了解多一些，其實這些問題是可以避免的。

一、假陰性結果原因

試劑質量：試劑比對、性能驗證、批間差等

檢測試劑：靈敏度

提取試劑：提取效率

標本因素

標本類型：肺泡灌洗液、痰液、鼻拭子、咽拭子、肛拭子等。

標本采集：采樣不規(guī)范、部位不當、采集標本中被感染的細胞太少或沒有。

標本保存、運輸與處理：室溫放置不超過4小時，應在2-4小時內送到實驗室。長途運輸應采用干冰等制冷方式保存。24小時未檢測的樣本應置于-70℃保存，新/冠病毒RNA病毒靶基因降解對于RNA樣品影響更加嚴重。

人員操作：采樣、核酸提取、結果解讀、問題分析糾正以及質量控制等。

二、如何避免假陰性措施

1、要保證試劑的質量，必須建立試劑驗證嚴格的SOP文件，每一批次的試劑比對、性能驗證必須認真完成并形成書面報告已備溯源。

2、重癥以及危重癥患者應該首/選肺泡灌洗液以及痰液。普通篩查最好選用鼻拭子。

3、操作人員一定選用技術能力合格，身體健康，心理素質較好的工作人員。

4、核酸提取應該嚴格執(zhí)行sop，符合試劑說明書要求，Sop建立必須科學具有操作性。

5、科學規(guī)范采樣。

6、規(guī)范送檢，合理時間檢測可以有效預防假陰性。

7、PCR抑制物是造成假陰性的重要原因，所以實驗室盡量不存放與實驗無關物品，安全柜應該無多余物品。吸頭選用去RNA酶的產品。

三、假陽性結果原因

陽性質控品交叉污染

強陽性標本交叉污染

擴增產物污染

四、如何避免假陽性措施

1、如果2份假陽性樣本均在陽性質控管附近，可以推測是加樣操作不當引起。

2、某一批檢測結果出現(xiàn)多個陽性結果，而且復檢仍為陽性，但是在其它機構檢測為陰性。這種結果多為樣本中有一個強陽性，因為操作人員操作不當導致后續(xù)樣本全為陽性，因為是原始樣本污染，所以復檢也為陽性。

3、實驗人員在常規(guī)篩查中發(fā)現(xiàn)單靶標陽性，工作環(huán)境檢測也能檢測到，該情況多為擴增產物污染，該情況出現(xiàn)多為工作人員無分區(qū)概念，擴增區(qū)沒有嚴格進行消毒造成高濃度擴增產物被帶入到提取實驗區(qū)，引起的假陽性。

（上述情況均可以通過分區(qū)操作、嚴格實驗室清潔消毒、加強操作人員的操作規(guī)范性避免。）

4、嚴格執(zhí)行三份陰性樣本隨機放在臨床樣本中參與整個提取擴增過程的質控策略。

5、擴增八連管的蓋子一定要蓋嚴以防泄露。

引起假陽性和假陰性的原因有很多，作為檢驗人應該嚴格執(zhí)行SOP，提高實驗人員的檢驗技能，把每個環(huán)節(jié)都落實到實處，真正做到“做你所寫，寫你所做"，那么我們的檢驗報告將非常科學公正。同時在全面抗擊疫情中展現(xiàn)出檢驗工作人員科學、專業(yè)、敬業(yè)的精神面貌。