細胞因子在體內具有重要的病理作用，在感染、炎癥、自身免疫病、免疫缺陷疾病等狀態下，部分細胞因子會明顯變化，根據這些指標可以判斷機體的免疫功能。血清、血漿或組織液中細胞因子檢測可以對疾病診斷和治療做出相應評價,具有重要的應用價值。廣泛應用于細胞生物學、免疫學以及腫瘤學等領域的流式細胞術是細胞因子檢測的一種方法。

由于血清、細胞培養上清、積液中的細胞因子含量低，不容易檢測，加上樣本數量少，傳統的方法無法滿足多因子檢測。流式微球捕獲芯片技術（CBA）微量樣本多重蛋白定量技術，是用流式細胞儀對多重蛋白進行定量檢測的方法，能夠同時對樣本中的多個指標進行定性、定量檢測，可用于細胞因子檢測。

流式細胞儀技術（FCM）技術可以應用流式細胞儀，結合單克隆抗體技術、免疫熒光染

色技術，對快速流動液體中的單細胞進行多種參數測量和分析。CBA 檢測系統采用聚苯乙烯熒光微球連結特定的捕獲抗體，捕捉待測物，同時再加入待測物的熒光抗體，三者形成夾心復合物，通過流式細胞儀進行檢測。流式細胞術的優點是同時可以進行多參數檢測，快速并且信息量大。

（1）能夠同時對單個樣本進行多種檢測

小鼠血清Th1／Th2／Th17 相關細胞因子是實驗中經常會用到的檢測指標，由于血清量少很難運用傳統的方法如ELISA法進行多因子檢測，而CBA 法正好能解決這一問題，它能夠一次性對血清中的IL－2、IL－4、IL－6、IFN－Υ、TNF、IL－10、IL－17A進行定量檢測。美迪西可以為廣大醫藥研發人員提供細胞因子及生物標志物的檢測服務，其生物分析部基礎設施齊全、儀器設備先進，擁有的流式CBA、MSD、Luminex系統等高/端技術平臺可以進行各種single plex或multiplex多形式的細胞因子和生物標志物的檢測。

（2）所需樣本量少、靈敏度高等

傳統ELISA方法每項實驗樣本用量50-200μl，而流式CBA檢測技術樣本用量少于50μl且分析靈敏度高達2.8pg/mL。對于稀有樣本，CBA只需少量樣本即可檢測細胞因子、抗體、抗原等多個指標。

（3）穩定性好

CBA 穩定性好、可重復性高，能避免酶聯免疫放大技術使信號失真導致的假陽性。

流式細胞術檢測用于細胞因子檢測是一種相對快速、重復性好并能準確定量的方法。但由于胞內分析步驟復雜，涉及變異因素多，可能會出現結果不穩定，較難重復等問題。

如在檢測血清時，由于血清成分復雜，細胞因子含量差距大，實驗中經常會出現分群不明顯、微球聚集、濃度太低等現象，對實驗結果造成很大影響。如流式CBA法的微球由聚苯乙烯材料制作而成，血清加入微球之后如果沒有充分渦旋，容易沉淀聚集，細胞因子不能充分跟微球結合，導致多群甚至聚集現象發生，檢測結果將是無效的。需要從制備混合微球開始到加入實驗管，直到上機檢測前每一步都必須充分渦旋，以避免微球發生聚集。

而且CBA操作過程繁瑣，對實驗人員技術要求高，從一定程度上限制了其廣泛使用。因此在具體實驗過程中，需要多次摸索，結合實驗中所遇到的問題進行分析，找出解決問題的辦法，并在今后實驗中規避實驗中的一些問題的出題，來提高實驗的有效性和準確性。